029-866905091 實驗室的環(huán)境和設施
法醫(yī)DNA實驗室對環(huán)境和設施嚴格控制,實行分區(qū)域管理和定期清潔制度,是避免DNA污染的有效手段。
1.1 實驗室分區(qū)
由于法醫(yī)DNA檢驗的高靈敏性,為了防止檢驗過程中的交叉污染,法醫(yī)DNA實驗室應建立實驗室分區(qū)和授權進入制度,各區(qū)域間的通風、排氣系統(tǒng)不得混用,無關人員不得進入實驗區(qū)域,不同區(qū)域的實驗設備及器械不得混用。
DNA實驗室的分區(qū)域管理,能夠保證在不同的實驗區(qū)域內完成不同的檢驗,按照DNA含量由少到多的順序,實現檢材和樣本的單方向流動。DNA實驗室必須設置案件受理和檢材保管區(qū)、樣品DNA提取區(qū)、DNA擴增區(qū)、DNA檢測區(qū)，有條件的實驗室還應設置初檢區(qū)、結果分析區(qū)、準備區(qū)等,其中DNA擴增區(qū)和檢測區(qū)還應設置緩沖區(qū),供技術人員更換工作服。對于微量DNA的檢驗,如接觸DNA等,由于檢材含有的DNA量少,更存在污染的危險,要設置專門的DNA提取區(qū)域。
PCR污染是法醫(yī)DNA實驗室的特點,也是實驗室污染防范的重點。在PCR擴增產物或等位基因標準對照物中含有高濃度的DNA目的片段,極少的量就會被檢測到,實驗室一旦發(fā)生此類污染,將很難清除,后果嚴重。對實驗室實行分區(qū)管理,嚴格按要求操作,能夠有效地預防污染發(fā)生,其中重點要對DNA檢測區(qū)進行嚴格管理。含有擴增產物或對照物的離心管只能在DNA檢測區(qū)打開,不允許帶出該區(qū)域;處理檢測區(qū)的廢物時要封裝嚴密;技術人員進出該區(qū)域要更換工作服。
1.2 實驗室清潔
做好實驗室的清潔工作是防止DNA實驗室內發(fā)生交叉污染的有效途徑。造成DNA交叉污染的原因多種多樣,主要是物證檢材之間或比對樣本與物證檢材之間的相互污染。DNA交叉污染的方式可以是直接接觸造成,也可以是通過一定的載體使外源DNA發(fā)生轉移造成,使DNA檢驗結果錯誤;前者容易發(fā)現和預防,后者則較難發(fā)現和預防,這要求實驗室要做到定期清潔和消毒。
實驗室的清潔范圍包括對工作臺面、儀器設備表面、重復使用的工具或器皿等的清潔。工作臺面重點部位包括實驗室受理檢材的柜臺、DNA提取工作臺、吸取DNA的超凈臺和檢材存儲柜等都是容易接觸并遺留DNA的區(qū)域;儀器設備主要有離心機的轉頭、提取DNA用的加熱塊、擴增儀的樣品槽、移液器桿的吸孔、遺傳分析儀的加樣槽等;重復使用的工具或器皿主要有剪取檢材樣本使用的剪刀及鑷子、配制試劑所用的試劑瓶等。
實驗室清潔主要是采用擦拭清洗的辦法,先用新鮮配制的10%漂白液(7mM次氯酸鈉溶液)將需要清理物體的表面反復擦拭,再用75%乙醇擦洗以去除殘留物,可以有效清除它們表面附著的各種污染物,條件允許的情況下定時進行紫外燈照射消毒。實驗室除要建立定期清潔制度外,一旦發(fā)現在檢驗過程中有可能發(fā)生DNA污染時,要及時清理和清潔。
今天關于實驗室防污染已經為您介紹到這里，實驗室建設和使用注意事項繁多，需要我們建設者和使用者不斷學習，希望今天的文章對您有所幫助。
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